Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)是一種強(qiáng)迫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(大鼠、小鼠)游泳,學(xué)習(xí)尋找隱藏在水中的平臺(tái)的一種實(shí)驗(yàn),主要用于測試實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對(duì)空間位置覺和方向覺(空間定位)的學(xué)習(xí)記憶能力。它廣泛應(yīng)用于學(xué)習(xí)記憶、阿爾茨海默病、海馬和外海馬、智力與衰老、新藥開發(fā)/篩選/評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)、行為生物學(xué)及時(shí)辰生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)(CAI)。
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
檢測動(dòng)物的空間記憶和探索能力。
二、實(shí)驗(yàn)原理
大(小)鼠雖然天生會(huì)游泳,但是它們性喜干燥,厭惡潮濕,同時(shí)游泳對(duì)于其而言是十分消耗體力的活動(dòng),因此它們會(huì)本能地尋找水中的休息場所。尋找休息場所的行為涉及一個(gè)復(fù)雜的記憶過程,包括收集與空間定位有關(guān)的視覺信息,再對(duì)這些信息進(jìn)行處理、整理、記憶、加固,然后再取出,目的是能成功地“航行"并且找到隱藏在水中的站臺(tái),終從水中逃脫。
三、實(shí)驗(yàn)材料與方法
(一)實(shí)驗(yàn)材料
1.實(shí)驗(yàn)設(shè)備 Morris水迷宮。
2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
(1)大鼠或小鼠(本實(shí)驗(yàn)以大鼠為例)。
(2)根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶⒋笫蠓纸M,并將每只大鼠編號(hào)。
(3)分籠飼養(yǎng),自由飲食,動(dòng)物房溫度21~25℃,相對(duì)濕度40%~60%,自然光照晝夜節(jié)律變化。
(二)實(shí)驗(yàn)具體方法
將各組大鼠在正式訓(xùn)練前一天分別放入水中自由游泳2min,使其熟悉水迷宮環(huán)境。然后對(duì)各組大鼠正式進(jìn)行Morris水迷宮測試。實(shí)驗(yàn)采用航行定位實(shí)驗(yàn)和空間探索實(shí)驗(yàn)分別測試大鼠的學(xué)習(xí)能力和記憶能力。
1.定位航行實(shí)驗(yàn)共5d 將大鼠從標(biāo)記的4個(gè)入水點(diǎn)依次朝向池壁輕輕放入水中,采集大鼠在2min內(nèi)尋找到并爬上平臺(tái)所用的時(shí)間(平臺(tái)在第3象限,平臺(tái)低于水位2cm左右),即逃避潛伏期(在站臺(tái)上穩(wěn)定10s算找到站臺(tái),否則繼續(xù)記錄)。如果大鼠2min內(nèi)未找到平臺(tái),需將其牽引到平臺(tái),并停留60s,這時(shí)潛伏期記為2min。
2.空間探索實(shí)驗(yàn)1d 撤除平臺(tái),將大鼠放入水池中,記錄大鼠在2min內(nèi)在平臺(tái)所放置的目標(biāo)象限停留時(shí)間和穿越平臺(tái)所在區(qū)域的次數(shù)。
(三)實(shí)驗(yàn)操作中的注意事項(xiàng)
(1)在開始實(shí)驗(yàn)前,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)與受試動(dòng)物建立良好的感情,讓動(dòng)物熟悉實(shí)驗(yàn)者的身體信息,如氣味、相貌等。捕捉動(dòng)物的動(dòng)作要溫柔,忌諱手抓鼠尾,以免過分刺激動(dòng)物。鼠的嗅覺很敏感的,在實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)當(dāng)避免使用較強(qiáng)氣味的化妝品或香水。另外。如果大鼠能夠看到實(shí)驗(yàn)者,在水迷宮實(shí)驗(yàn)過程中,實(shí)驗(yàn)者要躲藏或者保持固定位置,避免造成大鼠能夠看到人體移動(dòng)。
(2)水池不能太小,站臺(tái)也不能太大,水池太小或站臺(tái)太大都會(huì)增加大鼠隨機(jī)上臺(tái)的概率,出現(xiàn)假陽性結(jié)果。目前大鼠水迷宮的直徑大多為1.2m或1.6m,本實(shí)驗(yàn)所采用的直徑是1.6m。
(3)水溫對(duì)逃避潛伏期影響很大:如果溫度過高,大鼠游幾次后漸漸適應(yīng)迷宮環(huán)境,就把迷宮當(dāng)成“浴盆",在泳池中漂浮不動(dòng);如果溫度過低,大鼠體溫下降很快,體力也會(huì)耗散太多,不能堅(jiān)持很久,就會(huì)出現(xiàn)游幾次潛伏期突然增大的現(xiàn)象。所以要保證水溫在23~25℃。
(4)要保證水迷宮水面上沒有光影,主要是避免光線在水面的反射,以免留在水面的光照影子被軟件的采集系統(tǒng)混淆為大鼠的影子,影響結(jié)果自動(dòng)分析大鼠中心點(diǎn)。將屋子里的燈都關(guān)掉,窗簾都拉上,切斷光源。
(5)盡量保證實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有大鼠能夠看到的外參在實(shí)驗(yàn)過程中都要位置固定。
(6)大鼠訓(xùn)練完成后要用干布擦拭。并用烤爐烤干。